光学显微镜的主要参数包括放大倍数、数值孔径(NA)、分辨率、视场、景深和工作距离等。
一、放大倍数
光学显微镜的放大倍数，是指物体经过显微镜成像后放大的比例，这一比例是由目镜的放大倍数与物镜的放大倍数相乘得到的。例如，目镜的放大倍数是10倍，物镜的放大倍数是40倍，那么该显微镜的总放大倍数就是10乘以40，即400倍。
光学显微镜的放大倍数的计算公式为：总放大倍数 = 目镜放大倍数×物镜放大倍数。
值得注意的是，虽然放大倍数越高，观察到的物体细节就越多，但过高的放大倍数也可能造成图像失真或模糊。因而，使用光学显微镜时应当根据观察需求、样本特性选择合适的放大倍数。
此外，光学显微镜的放大倍数还受到其他因素的影响，如数值孔径、分辨率等。
二、数值孔径（NA）
数值孔径（Numerical Aperture，简称NA）是一个无量纲数，用于衡量光学系统收集光的能力，具体描述了透镜收光锥角的大小。
数值孔径是判断物镜和聚光镜性能高低的重要标志，其大小直接影响了显微镜的分辨率、对比度和亮度等关键参数。
计算方式：NA=n*sin a
其中n为透镜与被检物体之间介质的折射率，α为孔径角（透镜光轴上的物体点与物镜前透镜的有效直径所形成的角度）的一半。
数值孔径大小受到多个方面的影响：
①物镜结构与设计：物镜的最大半视角、设计精度以及设计类型均会影响数值孔径。通常，最大半视角越大、结构精度越高、设计越先进，数值孔径也越大。
②介质折射率：透镜与被检物体之间介质的折射率越高，数值孔径也越大。
③光源波长：光源波长越短，数值孔径通常越小。
④光学特性：物镜的非球差、折射、色差等光学特性也会影响数值孔径的大小，良好的光学特性能够保证较高的数值孔径。
⑤观察对象：数值孔径还与观察对象的形状大小有关，当物镜能够成像对象的整个形状时，其最小数值孔径可以反映观察对象的形状大小。
三、分辨率
光学显微镜的分辨率是指显微镜能清晰区分的两个物点的最小间距，又称鉴别率，它反映了显微镜对细节进行区分的能力。一般的光学显微镜的最大分辨率约为0.2微米。
分辨率的计算公式是σ=λ/NA，其中σ为最小分辨距离，λ为光线的波长，NA为物镜的数值孔径。
那么，如何提高分辨率呢？首先可以通过使用短波长光源，降低波长λ值，来提高分辨率；其次可以通过增大介质n值或孔径角α值，以提高NA值，进而提高分辨率；还可以通过调整显微镜的成像条件，增加明暗反差，从而提高分辨率。
四、视场
视场是指从显微镜中能看到的圆形范围，也叫视野。它代表着显微镜能够观察到的最大范围。
在光学显微镜中，视场数(FN)表示视野大小(FOV)，对应于中间图像中通过目镜可以观察到的区域。视场数(FN)定义为中间像面上可通过目镜观察到的区域的直径。
选择合适的视场数（FN）需考虑以下因素：
①观察需求：视场数越大，观察范围越广。根据观察样本的大小和需要观察的细节选择合适的视场数。
②目镜与物镜组合：视场数与目镜和物镜的放大倍数息息相关。目镜和物镜放大倍数越大，视场数通常越小。因此，需根据目镜和物镜的组合来选择合适的视场数，以获得最佳观察效果。
③分辨率与视场数的平衡：显微镜的参数之间相互联系又相互制约，选择视场数时应以保证分辨率为准。过大的视场数可能导致分辨率下降，影响观察效果。
五、景深
景深，也称焦深，是指在显微镜观察和拍摄样品时，从对准焦点的位置开始，改变物镜与样品表面距离时，对焦能保持清晰的范围。
景深由远景深度和近景深度组成。远景深度是指能成清晰像的最远平面与对准平面的距离，近景深度则是指能成清晰像的最近平面与对准平面的距离。景深等于远景深度与近景深度之和。
景深大小决定了显微镜观察时，能在多大范围内保持图像的清晰度。景深大，可以看到被检物体的全层；景深小，则只能看到被检物体的一薄层。
六、工作距离
工作距离是指试样调准焦点时，物镜前缘与试样表面（或盖玻片顶面）的距离。简单来说，就是物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离。
工作距离的大小主要取决于物镜的参数。因此，在选择物镜时，需要考虑工作距离的需求，以确保显微镜能够满足特定的观察要求。
长工作距离物镜焦距大于普通物镜，专为液态材料、液晶、组织培养等镜检设计，允许在不接触容器的情况下观察和研究样本，工作距离相对较长。
倒置显微镜物镜通常采用长工作距离设计，以适应溶液中悬浮物的观察，如培养液中的细胞，其工作距离比正置显微镜大。
普通物镜的工作距离因放大倍数而异，放大倍数越高，工作距离越短。
